如何快速評估16S rRNA基因引物的覆蓋率及特異性

背景 無論是在進行細菌、古菌高通量測序前,還是細菌、古菌qPCR前,最糾結的問題永遠是引物選擇。評估引物效果最重要的兩個指標是覆蓋率(coverage)和特異性(specificity)。簡單講,覆蓋率就是指目標引物能捕獲現有數據庫中靶序列的比例,比如,共有100種細菌的不同16S rRNA基因序列,某引物能擴增出其中的90種,那麼該引物的覆蓋率就是90%;特異性是指目標引物是否只靶標某特定類羣,
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